Всички лекции по хистология
спаси виво държавните структури;
да бъде достатъчно тънък прозрачен и да се проучи под микроскоп при преминаваща светлина;
да е друга страна, това е, за проучване на структурата под микроскоп трябва да бъдат ясно дефинирани;
препарати за светлинна микроскопия трябва да се поддържат в продължение на дълъг период от време и да се използват за повторно разглеждане.
Тези изисквания са постигнати при получаването на състава.
3. Разпределяне на следващите етапи на подготовка на хистологичен препарат
Материалът на улавяне (парчета тъкан или орган), за да се подготвят състава. Това се взема предвид следните точки: ограда материал трябва да се извърши възможно най-рано след смъртта или клането на животното и, ако е възможно, от дневната обекта (биопсия) за по-добре запазена структура на клетка, тъкан или орган; парчета от оградата трябва да бъдат направени с остър инструмент, така че да не се травматизират тъканта; дебелина на среза не трябва да превишава 5 mm, към разтвора на фиксиране може да проникне във вътрешността на парче; непременно произвежда парче маркировка (посочете име на тялото на животното, или номер фамилия човека, дата на вземане на проби, и така нататък).
Фиксиране материал е необходимо да се спре метаболитните процеси и запазване на структури от разпад. Фиксирането се осъществява чрез потапяне често парчета при определяне течност, която може да бъде прости алкохоли и формалдехид и разтвор комплекс Carnoy, а друга Tsinker фиксатор. Фиксаторът причинява денатуриране на белтъците и по този начин спира метаболитни процеси и съхранява структура в държавата на неговия живот. Фиксирането може да се постигне също така чрез замразяване (охлаждане в поток от СО2, течен азот, и т.н.). Продължителност фиксиране избран емпирично за всяка тъкан или орган.
Пълнене парчета в запечатване среда (парафин, целоидин, смола) или се замразява за по-късно производство на тънки парчета.
Получаване на секции на специални инструменти (микротомни или ultramicrotome) със специални ножове. Разрязани за светлинна микроскопия са залепени върху стъклени плочки, както и за електронна микроскопия - монтирана на специална мрежа.
Боядисване или контрастен секции (за електронна микроскопия). Преди отстранени живопис секции запечатване среда (депарафиниращ). се постига контрастен цвят на структурите. Багрила са разделени на основни, киселинни и неутрални. са най-широко използваните основни багрила (обикновено хематоксилин) и кисел (еозин). Често се използват багрила.
Пробуждане секции (ксилен, толуен), намиращи се в смолата (балсам, полистирен), затваряне на капак стъкло.
След тези последователни лекарствени лечения могат да бъдат изследвани под светлинен микроскоп.
За целите на електронна микроскопия в етапите на подготовка на наркотици, са някои от функциите, но общите принципи са едни и същи. Основната разлика се състои в това, че хистологичен препарат за светлинна микроскопия може да се съхранява за постоянно и се използва повторно. Разрязани за електронна микроскопия се използва само веднъж. В този случай, първо снимат обектите на интерес на лекарството, както и изследване на структури се провежда вече в електрона.
Течен последователност от тъкани (кръв, костен мозък и т.н.) са направени под формата препарати намазка върху предметно стъкло, което също е фиксиран, оцветени, и след това изследвани.
От чупливи паренхимните органи (черен дроб, бъбреците, и т.н.) са направени в отпечатък под формата препарати тяло: след празнина фрактура или орган за местоположение вина орган прилага слайд стъкло, на която са залепени някои свободни клетки. След това получаване се фиксира, оцветени и изследвани.
Накрая, някои от органи (мезентериална тъкан, PIA) или на насипни продукти съединителната тъкан са направени от разтягане на фолиото или смачкване между двете стъкла, и с последващо фиксиране, оцветяване и се налива в смола.
светлинна микроскопия (резолюция 0.2 микрона), най-често срещаният тип на микроскопия;
UV микроскопия (резолюция 0.1 микрона);
Флуоресцентно (флуоресцеин) микроскопия за определяне на химикали в тези структури;
фазово-контрастен микроскоп за изследване на структури в неоцветени хистологични препарати;
поляризиращ микроскоп за изследване, главно влакнести структури;
тъмно микроскопия поле за изучаване на живите същества;
микроскопия в падащата светлина за изучаване на дебели обекти;
електронна микроскопия (резолюция 0.1-0.7 пМ), две неговите варианти полупрозрачен (предаване) електронна микроскопия и сканираща микроскопия или растер картографиране дава подструктури повърхност.
Хистохимични и цитохимични методи позволява да се определи състава на химични вещества и тяхното количество, дори в изследваните структури. Методът се основава на провеждане химични реакции с използваните реагенти и химическите вещества в субстрата за да се образува реакционен продукт (контраст или флуоресценция), който след това се определя от светлина или флуоресцентна микроскопия.
диференциално центрофугиране метод позволява да се проучи отделните органели или фрагменти, получени от клетката. За тази парче изследвани органи се стрива, изсипва се нормален физиологичен разтвор и след това се диспергира в центрофуга с различни скорости (2-150 ти.) До получаване на фракции от интерес след това се изследват чрез различни методи.
метод интерферометрията за определяне на масата на сухи вещества в живи или неподвижни обекти.
Immunomorfologichesky методи дава използвайки предварително имунни реакции, извършени на базата на антиген-антитяло взаимодействие, за да се определи субпопулация на лимфоцитите да се определи степента на чуждестранен клетки проведе хистологично типизиране на тъкани и органи (определи хистосъвместимост) за трансплантация на органи.
Метод на клетъчна култура (ин витро, ин виво) култивиране на клетки ин витро или в специални капсули в организъм и последващо изследване на живите клетки под микроскоп.
Единиците, използвани в хистология
За измерване на структурите в светлинен микроскоп се използва главно микрометра: 1 М е 0.001 mm; в електрон микроскопски нанометра използват 1 нм е 0,001 микрона.
5. В историята на хистология условно разделена на три периода:
Domikroskopichesky период (в IV. Пр. Е. В 1665 YG), свързани с имена Аристотел, Гален, Авицена Vesalius, характеризиращ Фалопиевата и опити за изолиране на животни и хора нехомогенни тъкан (твърд, мек, течни и т.н.) и използване на методи на анатомична дисекция.
Особено внимание бе отделено на изучаването на структурата на клетката. присъствие Yang Purkinje описано в животински клетки "протоплазма" (цитоплазмени) и ядрото, а по-късно потвърди наличието на ядро R. Brown и в повечето животински клетки. Botanist М. Schleiden интересуват kletoktsitokenezisom произход. Резултатите от тези изследвания са оставя Т. Schwann, въз основа на техните съобщения, клетъчна теория формулирани под формата на три постулати (1838-1839 GG.):
Всички растения и животни са съставени от клетки;
всички клетки се развиват на общия принцип на tsitoblastemy;
всяка клетка има независима жизнените функции и жизнените функции на организма е сумата от дейността на клетките.
Обаче, малко Virchow (1858), като че развитието на клетките се осъществява чрез разделяне на първоначалните клетки (всяка клетка на клетките). Проектиран от Т. Шван теория разпоредби клетка са от значение за настоящето, макар и формулирани по различен начин.
Сегашната ситуация на теорията на клетката:
клетка е най-малката единица на живот;
животински организми клетки са подобни в тяхната структура;
възпроизвеждане на клетките се осъществява чрез разделяне на оригиналната клетка;
многоклетъчни организми са сложни системи от клетки и техните производни, комбинирани в системите на тъкани и органи, свързани помежду си клетъчни, хуморални и невронни форми на регулиране.
Допълнителни микроскопи подобрение, по-специално за създаването на ахроматични лещи, разкрити в клетки малки структури:
клетъчен център Hertwig, 1875.
мрежа или апарат плоча Golgi комплекс, 1898.
митохондрии Benda 1898
В настоящия етап на развитие на хистология започва с 1950 от началото на използването на електронен микроскоп за изследване на биологични обекти, въпреки електронен микроскоп е изобретен по-рано (Е. Руска, М. Knoll, 1931). Въпреки това, за този етап на развитие се характеризира с въвеждането на хистология, не само на електронен микроскоп, но също така и други методи: cyto- и хистохимия, gistoradiografii горе и други съвременни техники. Той обикновено се използва от различни сложни техники, което позволява да се направи не само качествена картина на изследваните структури, но също така да се получат точни количествени характеристики. Особено широко използвани понастоящем различни морфометрични техники, включително автоматизирана система за обработка на информация, получена с помощта на компютър.
ЛЕКЦИЯ 2. цитология. цитоплазма
1. Концепцията за цитология
2. Структура plasmolemma
3. Структурата на контактите на клетка-клетка
4. Състав hyaloplasm
5. Класификация на органели
6. общи органели Структурата
7. Структурата на не-мембрана органел
8. Класификация включвания
1. цитология наука за структурата, развитието и клетъчната активност. Ето защо, биологията клетка изучава моделите на структурна и функционална организация на първия (клетка) нивото на организация на живата материя. Клетката е най-малката единица на живата материя, която има самостоятелен живот и възможността за самостоятелно копие. Образованието на субклетъчно (ядро, митохондрии и други органели), въпреки че те са живи същества, но не разполагат с независим живот.
Елементен единица клетка на живот, състояща се от цитоплазмата и ядрото и е в основата на структурата, развитието и функционирането на всички животински и растителни организми.
Основните компоненти на клетката:
От съотношението на ядрото и цитоплазмата (съотношение ядрено цитоплазмен), клетките се разделят на:
Ядрена клетъчен тип преобладава над обема на ядрото на силата на звука на цитоплазма;
клетъчната цитоплазма цитоплазмен тип преобладава над сърцевината.
Формата на клетката са:
кръгли (червени кръвни клетки);
куб или цилиндрични (клетки от различни епител);
Метод (нервни клетки) и други.
Повечето клетки съдържат едно ядро, но могат да бъдат в клетка 2, 3 или повече ядра многоядрени клетки. В тялото има структури (symplasts, sintitsy), съдържащи няколко десетки или дори стотици ядра. Въпреки това, тези структури са образувани, или от сливането на отделните клетки (symplasts) или поради непълно клетъчното делене (синцитий). Морфологията на тези структури ще бъдат разгледани в изследването на тъканите.
Структурните компоненти на цитоплазмата на животински клетки:
Plasmolemma заобикалящата цитоплазма, често се счита за един от най-органели на цитоплазмата.
2. Структура и функция plasmolemma (tsitolemmy)
Plasmolemma животинска клетка плик очертаващ нейната вътрешна среда и осигуряване на взаимодействие с извънклетъчен клетъчна среда.
Plasmolemma има дебелина от около 10 пМ, и се състои от 40% липиди, 5-10% от въглехидрати (като част от гликокаликса) и 50-55% на протеини.
рецептор или антиген;
образуването на контактите клетка-клетка.
база структура на plasmolemma molekulbilipidnaya липидна двуслойна мембрана, която поставя Incorporated протеинови молекули, също имат слой от гликокаликса nadmembranny структурно свързани протеини и липиди bilipidnoy мембрана, и в някои клетки има submembrane слой.
Структурата на bilipidnoy мембранната
Всяка монослой от молекулите му се образува главно от фосфолипиди и частично холестерол. В същото време във всяка липидна молекула разграничат две части: хидрофилна глава и хидрофобна опашка. Хидрофобните опашките на липидни молекули са свързани един с друг и образуват bilipidny слой. Хидрофилна глава bilipidnogo слой в контакт с външната или вътрешната среда. Bilipidnaya мембрана, и по-точно дълбоката си хидрофобен слой изпълнява функцията на бариера, за предотвратяване влизането на вода и вещества, разтворени в него, както и големи молекули и частици.
три слоя от външната и вътрешната elektronnoplotnye междинно съединение с ниска електронна плътност определя чрез електронна дифракция на plasmolemma ясно.
Протеинови молекули са включени в слой bilipidny мембранната локално и не образуват непрекъснат слой. Според локализацията на мембранните протеини се разделят на:
Интегрална bilipidnogo проникнат през цялата дебелина на слоя;
poluintegralnye включва само монослой от липид (външен или вътрешен);
в непосредствена близост до мембраната, но не и вграден в него.
Според функцията извършват plasmolemma протеини се разделят на:
Разположен на повърхността plasmolemma протеини, липиди и хидрофилните глави обикновено са свързани въглехидратни вериги, и полимерните молекули образуват комплекс гликолипиди и гликопротеини. Именно тези макромолекули и да nadmembranny слой - гликокаликса. В делящите се клетки има submembrane слой, образуван микротубулите и микрофиламенти.